1.受损伤的马铃薯细胞内酚氧化酶(PPO)和底物(酚类物质)直接接触,会引起马铃薯的褐变。某实验小组查阅资料得知酚氧化酶的活性与pH的关系如图所示,为进一步探究温度对PPO活性的影响,实验小组进行如下实验:
(1)PPO粗提液的提取:在低温下将新鲜马铃薯用蒸馏水洗净、去皮,取20g样品放入含50mL磷酸缓冲液(pH值为5.5)的研钵中,同时加入少量石英砂,研磨,取上清液即为PPO的粗提液,加磷酸缓冲液目的是______。
(2)不同温度下PPO活性的测定(注:反应底物充足,“+”越多,褐色越深)
组别
步骤顺序 |
试管1 |
试管2 |
试管3 |
试管4 |
试管5 |
试管6 |
试管7 |
试管8 |
①PPO粗提液 |
2mL |
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2mL |
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2mL |
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2mL |
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②酚类底物 |
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2mL |
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2mL |
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2mL |
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2mL |
③反应 |
混合振荡 |
混合振荡 |
混合振荡 |
混合振荡 |
混合振荡 |
④温度预处理 |
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⑤保温 |
5min |
5min |
5min |
5min
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⑥记录结果 |
+ |
++++ |
++++ |
++ |
实验步骤顺序有不妥之处,请改正______。
(3)为进一步探究PPO活性最佳温度,应在______范围内设置温度梯度进行多次实验。 |